test ELISA et chimie organique
DIVERS
+ DE 2 ANS
Le 22/05/2005 à 10h14
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Question d'origine :
bonjour,
j'ai entendu parler de l'utilisation de la methode ELISA pour detecter le présence et le taux d'infection du blé par le champignon SEPTORIUM TRITICI ( septoriose du blé). de plus, des éprouvettes ont été créer permettant de réaliser les tests "au champs" pour détecter ce meme champignon.
ma question est est-ce que je peux reproduire ce test chez moi et quelle en ai la methodologie?
Réponse du Guichet
anonyme
- Département : Équipe du Guichet du Savoir
Le 23/05/2005 à 13h06
Le test ELISA (acronyme de Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay) est un test immunologique destiné à détecter et/ou doser une protéine dans un liquide biologique. Dans la technique de dosage dite "en sandwich", les puits d’une microplaque sont tapissés avec un anticorps de capture capable de lier spécifiquement l’antigène recherché. Lors de cette opération appelée coating, l'anticorps de capture se fixe au plastique des puits par interaction électrostatique L'anticorps de capture assure la spécificité du test. La solution à tester est ensuite déposée dans les puits de la microplaque et si l'antigène recherché est présent il va se lier spécifiquement à l’anticorps de capture. Un deuxième anticorps, l'anticorps traceur, capable de se lier à l'antigène capturé est alors ajouté dans le puits et les anticorps traceurs non fixés sont éliminées par rinçage. L'anticorps traceur est couplé à une enzyme catalysant la formation d'un produit coloré. La réaction peut ainsi être quantifiée par colorimétrie à partir d'une courbe d'étalonnage réalisée avec des concentrations connues d'antigène puisque le nombre de molécules d'anticorps traceur fixées dépend du nombre de molécules d'antigènes immobilisées par l'anticorps de capture.
source : Université Pierre et Marie Curie
Certains laboratoires proposent effectivement des tests prêts à l'emploi, comme le SEPTOtest pour Septoria tritici des laboratoires ADGEN commercialisé par la société LCA. Les kits SEPTOtest sont proposés sous forme de kits complets prêts à l'emploi, avec microplaques précoatées, et une durée globale d'analyse de 30 minutes.
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